本发明提供一种持续分泌活性软骨素酶ABC的人干细胞的制备方法，其中，所述方法包括构建无N端信号肽软骨素酶ABC基因并在基因3’端加上加入提高转录和翻译的基因片段，构建到病毒载体上，转染人干细胞制备成可持续分泌活性软骨素酶ABC的人干细胞，以促使人干细胞长期有效分泌骨素酶ABC，-20℃下长期下保存仍具有酶活性；本发明还提供了持续分泌活性软骨素酶ABC的人干细胞的临床应用，该人干细胞将从种子细胞与改善不利于神经再生的微环境两方面入手，有望对慢性神经退行性疾病的治疗达到“双管齐下”的效果。