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一种小鼠毛囊干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法
编号:S000012575 刷新日期: 有效日期至:2020-10-17 浏览:1728 对接邀请:0
意向价格: 面议
所在区域:中国 - 山东 技术领域:医疗卫生 - 生物医药
转让类型:合作研发
专利类型:发明专利 技术成熟度:可以量产
供应描述
本发明涉及一种小鼠毛囊干细胞体外向原始生殖细胞分化的技术方法,按照如下步骤操作:第一步,利用机械法分离出生后7天小鼠触须部毛囊;第二步,体外培养毛囊干细胞:毛囊经DMEM/F-12洗完后,置于0.25% Trypsin-0.04%EDTA,37℃消化10分钟,轻轻吹打混匀后加入10%血清终止消化,于DMEM/F-12中清洗,过400目细胞筛后转入毛囊干细胞培养液培养;第三步,将传代两次的毛囊干细胞体外培养形成拟胚体EB;第四步,制作小鼠成纤维细胞培养及饲养层细胞;第五步,EB培养后与饲养层共培养向原始生殖细胞分化。本发明方法获得了与体内正常原始生殖细胞形态和特异分子标记表达类似的原始生殖细胞。
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机构地址:No.490, S.Ning'an Str., Yinchuan,Ningxia 查看地图
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