本发明涉及一种干细胞在外源性神经营养因子作用下分化及鉴定的方法，包括有以下步骤：胚胎大鼠脊髓神经干细胞的分离和扩增；依赖EGF和FGF的神经球细胞在不同外源性因子作用下的培养及分化；含HIF-1α、BDNF序列的重组腺相关病毒的构建；大鼠脊髓神经干细胞的体外转染及分析：表达产物的测定和生物活性分析。本发明的干细胞分化及鉴定的方法性能稳定。