本发明涉及一种人工模拟骨髓微环境培养骨髓间充质干细胞的方法，包括以下步骤：获取骨髓间充质干细胞，采用三维细胞培养支架于培养基中进行体外培养；其中，所述三维细胞培养支架是由胶原和壳聚糖或赖氨酸制成；或所述三维细胞培养支架是由胶原与壳聚糖和戊二醛制成的。通过采用壳聚糖或赖氨酸，亦或是壳聚糖和戊二醛对胶原支架进行改性，以提高胶原支架的机械性能，并利用其三维多孔结构维持骨髓间充质干细胞体外培养过程中的三维生长环境，以更好地模拟适宜骨髓间充质干细胞生长的骨髓微环境，解决了现有技术中，采用单一三维细胞培养支架培养骨髓间充质干细胞存在支架机械性能弱等缺陷造成细胞增殖率低、易死亡等问题。