本发明提供了一种脱乙酰几丁质/海藻酸钠干细胞微囊及其制备和培养方法，制备方法包括：将海藻酸钠于水中分散后再加入待培养的干细胞，制成海藻酸钠和细胞的混合悬液；将脱乙酰几丁质用醋酸盐缓冲液分散，制成脱乙酰几丁质溶液；将混合悬液加入至所述脱乙酰几丁质溶液中进行凝聚。本发明制备微囊相比通常的聚赖氨酸/海藻酸钠细胞培养微囊，其包膜结构采用脱乙酰几丁质和海藻酸钠形成，两者不仅阴阳离子电性结合，还进一步利用脱乙酰几丁质的强吸附性，提升结合形成的包膜的强度，可以防止其在培养过程中被降解。具有更良好的溶胀、缩胀等稳定性能，能形成较好的细胞生长环境，提升细胞培养扩增的效率。