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利用重组慢病毒诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的方法
编号:S000013441 刷新日期: 有效日期至:2020-11-07 浏览:1502 对接邀请:0
意向价格: 面议
所在区域:中国 - 江苏 技术领域:医疗卫生 - 生物医药
转让类型:合作研发
专利类型:发明专利 技术成熟度:可以量产
供应描述
本发明涉及一种生物工程技术,具体地说是一种利用基因重组病毒诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的方法:重组慢病毒载体构建;神经干细胞的分离、培养及鉴定;重组病毒转染NSCs;重组慢病毒转染NSCs的鉴定;重组病毒转染NSCs:取传代3次后的NSCs消化制备成单细胞悬液,接种至培养板中;转染TH+Brn4基因重组慢病毒;加入慢病毒和ploybrene,摇晃混匀后将培养板置培养箱中培养,12小时后更换新鲜分化培养基;同时用嘌呤霉素进行筛选,以获得稳定转染的细胞;本发明的优点在于:通过构建目的基因TH和Brn4的慢病毒载体,转染NSCs后外源性基因能在细胞内稳定表达;分化后产生高比例的TH阳性多巴胺能神经元;Brn4能促进神经营养因子的高表达,且具有抑制细胞凋亡的功能。
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