本发明属于卫生检验领域，涉及一种用于检测兽鼻支原体的LAMP试剂盒及其建立的方法和应用。该试剂盒主要包含由四条LAMP引物的LAMP反应液和阳性模板及核酸染料组成。经检测验证，本发明试剂盒具有良好的特异性、灵敏度，扩增快速、高效，且鉴定简便。本发明的检测体系在60℃-62℃等温条件下，能快速、方便、高效、高特异、高灵敏度地检测到兽鼻支原体，不需要复杂仪器，能较好满足对兽鼻支原体的现场检测，为兽医安全卫生的检测提供了新的技术平台，能较好的满足目前对兽场养殖现场检测的迫切需要，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。