本发明公开了一种卤蕨离体再生体系建立的方法，它以孢子囊群为外植体，外植物体表面消毒后，接入以1/4MS基本培养基的各类型培养基中，通过孢子囊中孢子的离体萌发获得原叶体，部分原叶体可继续进行增殖培养，另一部分原叶体用来诱导产生幼孢子体，幼苗经生根培养后移栽于基质，最终形成卤蕨种苗。本发明可在短时期内获得大量优质种苗，填补了该种现有的技术空白，同时也为园林栽培、中药研发和红树林生态恢复工作提供了有力的技术保障。