本发明一种强心苷类化合物及其制备方法和应用，涉及医药技术领域。强心苷类化合物名称为蟾毒灵-3b-丙烯酸酯，分子式为C₂₇H₃₆O₅，结构式如下，是从中药蟾酥中分离制得的一种强心苷类化合物，体外抗肿瘤试验表明，该化合物对A549 人肺癌细胞株和K562 人白血病细胞株有显著的抑制作用，IC₅₀值分别为7.16×10^-3和6.83 ×10^-3μmol/L。本发明可为研制抗肿瘤药物提供新的化学实体或先导化合物，对开发利用中国的传统药物具有重要价值。本发明还公开了从中药蟾酥中分离制备一种强心苷类化合物蟾毒灵-3b-丙烯酸酯的具体方法。