本发明公开了一种异橙酮糖苷类化合物及其制备方法和应用，所述的异橙酮糖苷类化合物是从腊肠树中分离得到的，其分子式为C₂₁H₂₀O₁₀，结构式为：该化合物命名为：5,6-二羟基异橙酮-4′- O-β- D-葡萄糖苷。制备方法包括原料处理、超声提取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离、凝胶柱层析。所述的异橙酮糖苷类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。本发明的异橙酮糖苷类化合物是首次从腊肠树中分离出来，可以确认其分子式和结构。本发明异橙酮糖苷类化合物提取方法简单易行，化合物结构简单，人工合成也易于实现。经半叶法试验测试，本化合物对烟草花叶病毒的相对抑制率为32.2%，高于对照宁南霉素的28.6%，该化合物可作为抗烟草花叶病毒药物的先导性化合物。