本发明公开了一种黑老虎的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：A、外植体的选择与处理：取靠近黑老虎茎尖顶端的幼嫩叶片，消毒处理后得无菌外植体；B、外植体的诱导；C、愈伤组织的防褐化处理；D、愈伤组织的分化；E、继代增殖培养；F、壮苗培养；G、生根培养；H、炼苗与移栽。本发明的组培方法将黑老虎外植体褐化率控制在7％以下，生根率达到95％，成苗率达到97％以上。