本发明公开了两种苯妥因的检测方法，包括以下步骤：将待测样本与抗苯妥因特异性抗体接触；根据待测样本中的物质与抗体的结合情况，判断样本中苯妥因的含量，其中抗苯妥因特异性抗体由苯妥因免疫原免疫动物得到。本发明的两种检测方法，特异性高，可以准确地测定苯妥因的含量，为苯妥因的临床药物浓度实时监测提供了依据。