本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及一种细胞培养基质及其应用与使用方法。本发明提供的细胞培养基质，包括胶原蛋白膜和培养液。本发明利用胶原蛋白膜作为载体，配合有效的培养液，促进了hUC-MSCs向角膜上皮细胞的分化。实验表明，将hUC-MSCs接种于胶原蛋白膜后以本发明所述的培养液诱导7天后hUC-MSCs分化率可达32％。而不采用胶原蛋白膜为载体的诱导的分化率仅为9.54％。说明采用胶原蛋白膜能够显著提高hUC-MSCs向角膜细胞分化的效率。