本发明涉及一种临床用牙髓干细胞及其制备方法，本发明提供牙髓干细胞符合临床应用要求，其制备方法包括采集健康的牙齿、牙髓分离、牙髓干细胞培养、干细胞传代培养和冷冻、干细胞扩大培养、干细胞临床使用前处理，使用无血清培养基，在相关步骤进行严格的病毒、细菌、真菌检测，活率无明显降低、安全性高。本发明拟从原料采集开始直至细胞制备完成的全过程进行临床级、统一、系统监控，以实现牙髓干细胞的临床标准产品。